基因工程抗體是指利用基因工程技術将抗體基因重組和克隆到表達載體中,并在合适的宿主中表達和折疊成功能性抗體分子。基因工程抗體具有分子小、免疫原性低、可塑性強、成本低等優點。該技術的基本原理是從雜交細胞、免疫脾細胞和外周血淋巴細胞中提取mRNA,反轉錄成cDNA,然後将擴增的重鍊和輕鍊基因抗體分别進行PCR,以某種方式保留原始文本抗體的親和力和特異性。基因工程抗體主要通過修飾這些區域獲得。
1、生物傳感器:生物傳感器主要用于測定抗原和抗體的親和力。它利用抗體與抗原相互作用引起的細胞質表面共振來改變偏振光的反射。與傳統方法相比,它可以描述曲線并提供顯示動态變化的信息。
2、噬菌體庫技術的進展:過去,大多數材料都是抗病毒抗體。由于病毒具有較強的抗原特異性,很容易篩選出相應的抗體。此外,該方法也得到了改進。例如,已經開發出一種選擇性感染噬菌體的方法,可以同時分離和克隆小肽抗原和相應抗體。另一個例子是,片段基因可以通過噬菌體技術獲得,然後重組技術可以産生新的雙功能或雙特異性抗體、抗體和免疫粘附的混合分子。
3、表達和生産:為了擴大表達和生産規模,節約成本,轉基因家畜可用于生産人類蛋白質。例如,利用轉基因綿羊生産A1抗胰蛋白酶、纖維蛋白原和轉基因乳腺分泌抗體;利用轉基因小鼠産生高親和力和高特異性的人整體抗體。
4、細胞内抗體定位:為了進一步了解抗體基因和抗體蛋白在細胞内的表達和功能,以及代謝和功能之間的關系,可使用抗j鍊和K鍊抗體定位抗體的可變區和單鍊抗體;使用标記肽或部分肽的抗體,可以定位标記的全局抗體或可變區域抗體。總之,免疫細胞化學和免疫電鏡可以用來研究細胞内免疫的形态學。
5、無抗原技術:美國基因科學引入的無抗原技術具有一定的吸引力。它被認為是一種生産高親和力、高特異性單克隆抗體的新技術。在缺乏佐劑的情況下,小抗原可以産生針對小肽的抗體,而無需先交聯成大蛋白。主要方法是在無菌環境中使小鼠出生時保持無菌,所用飼料成分的分子量保持在10000道爾頓以下。包括氨基酸、單糖、脂類、維生素和礦物質。
6、細胞内抗體技術:非淋巴細胞表達生物活性抗體,并通過适當修飾抗體分子,将其定向分布在細胞核、細胞質或某些細胞器中,從而特異性幹擾或阻斷該部位的分布。某些生物成分的活動、加工和分泌引起細胞一系列生物過程的變化。它是繼反義RNA、特異性核酶、顯性負突變和“自殺”基因等技術之後的一種新的基因治療方法。它是抗體工程技術和基因治療的結合。
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